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细胞实验
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探索AKT基因调控对三阴性乳腺癌增殖和迁移功能的影响
PI3K/AKT/mTOR信号通路是一个关键的细胞信号转导网络,它通过一系列的分子事件调控细胞生长、增殖、存活和代谢。AKT蛋白,也称蛋白激酶B(Protein Kinase B,PKB),是一种在细胞中发挥关键作用的丝氨酸/苏氨酸激酶。它在细胞生长、存活、代谢、细胞周期进程和细胞运动等多种生物学过程中扮演着重要的角色。本次选择了AKT蛋白作为切入点进行研究。
图1. PI3K/AKT/mTOR信号通路示意图
细胞模型:选择MDA-MB-231细胞作为此次的研究模型。
动物模型:具体信息请联系销售经理;
3.1 基因操作:
基因敲低:AKTshRNA-PLKO.1图谱
基因过表达:2×AKT-pCDNA3.1+图谱
3.2 转染造模:
3.3 分子生物学技术
Western Blot (CK 过表达 敲低):
qPCR:
3.4 功能实验:具体信息请联系客服:
细胞增殖:
细胞迁移和侵袭:
本次实验选择PI3K/AKT/mTOR信号通路的AKT蛋白作为研究对象,构建了2×AKT过表达质粒和shRNA敲低质粒对AKT基因在转录水平和蛋白水平进行研究,两个水平的趋势一致;AKT基因在过表达的情况下细胞的增值和迁移水平显著提高,AKT基因在细胞增值和迁移方面发挥着关键作用。

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