本公司在流式检测项目中，不仅会提供流式上机原始数据及实验报告，还会将原始数据按照客户的不同要求进行FlowJo分析，并且提供分析后的图片以及FlowJo原始文件，本次我们以流式CD4/CD8分型为例，向大家展示如何分析数据，以下是具体分析步骤：
一、图片导出：
1、打开FlowJo分析软件，将FCS文件整体拖入FlowJo工作栏中。
2、整体操作流程依次按照：修改横纵坐标为FSC-A和SSC-A→点击“T”修改横纵坐标大小→选取自定义圈门工具画目的细胞→选取自定义圈门工具画Single cell→按染色指标依次圈门→应用于所有样本→依照单阳组调整门位置。整体流程如下图所示：
完成上述流程后，点开任意样本管即可看到各组样本各指标阳性表达情况，如下图所示：
3、完成上述样本圈门之后，进行下一步图片导出，整体操作流程为：单击“Layout Editor”→拖选所需图片→排版→设置导出格式、导出位置等，具体操作如下。
4、当选择“New Layout”，则可以将所有样本（文本框中的图片）拉入新的文本框里。假如每组有三个样本，则可以选择“Columns”和“Across”和“3”（红色箭头）。再单击“Create-Batch Report”（蓝色箭头），就可以在新的文本框（Layout-2-Batch）里得出，一行有3个，且是从左到右，从上到下，依次排序的（按照软件分析界面上的顺序）。
5、若想要直接复制粘贴图片，则可以在“Edit”界面（红框），选择复制选项，在粘贴在你想要的位置（word或者ppt里）。
在流式细胞术研究中，规范化的数据分析流程是确保实验结果可重复性的基石。通过FlowJo平台进行图像导出时，建议优先采用600dpi TIFF格式保留原始数据细节，同时通过Layout Editor统一坐标参数以维持可视化一致性。
下期将会分享流式补偿的分析内容，敬请期待，如有疑问请联系奥创生物技术服务团队进行咨询
